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更新時間:2012-12-24
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主要(yao)儀器及(ji)試剂配製儀器:塑料盃,往复(fu)式振荡機,分光光度(du)計或光電比色計試剂(ji): (1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提(ti)剂(ji)称取1.11克NH4F溶於800毫(hao)升水中,加1.0molL-1HCl25毫升,然后稀释至(zhi)1升,贮於(yu)塑(su)料瓶中,其它試剂同前法。
(2)钼锑(ti)抗試剂 称取酒石酸锑(ti)钾(KSbOC4H4O6)0.5克,溶於100毫(hao)升水中,製成5%的(de)溶液(ye)。
另称取钼酸铵20克溶於450毫(hao)升水中,随后徐徐加入(ru)208.3毫升(sheng)浓硫酸,在(zai)加入過程中需边加边搅動,以確保混合均匀並(bing)控(kong)製反應熱。再將(jiang)0.5%的酒石酸锑钾溶液(ye)100毫升加(jia)入到钼酸铵液中,進一步增強溶(rong)液的絡合性能。
臨用前(当天)称取1.5克左旋抗(kang)坏血酸溶液於100毫升钼锑混合液中,混匀(yun)。此即(ji)钼锑抗試剂。(有(you)效(xiao)期24小時,如贮於冰箱中,則有效期较长。)
磷標準溶液的製備過程中,需準確称取(qu)0.439克經105℃烘烤2小時的KH2PO4,將其溶解於200毫升(sheng)蒸馏水中,随后加入5毫升浓H2SO4以(yi)調節溶液的(de)酸性環境,確保磷元素的稳定性。將配製好的溶液轉移至(zhi)1升容(rong)量瓶中,用蒸馏水逐次定容至刻(ke)度線,最終获得(de)浓度(du)為100 mgkg-1的磷標準液,该溶液可在適当条件下较长時間保存而不產(chan)生顯著變化。
土壤樣品的前(qian)處理與(yu)浸提操作流程如下:首先称取已通過1毫米(mi)筛孔的風干土樣品5克(精確(que)到0.01克),將其置於150毫升塑料盃中。随后加入0.03molL-1NH4F——0.025molL-1HCl浸(jin)提(ti)剂50毫升,该浸提剂配方可(ke)有效溶解(jie)土壤中特定形態的养分。將裝有樣品(pin)的塑料(liao)盃置於20—30℃的恒温環境下(xia)進行振荡30分鐘,充分接触保證浸提效率。
吸取滤液10—20毫升於(yu)50毫升容量瓶(ping)中,加入10毫升0.8M H3BO3溶液以調節(jie)溶液環(huan)境,再加入二硝基(ji)酚指示剂2滴作為pH监測(ce)指示(shi)物,用稀HCl和NaOH液調(diao)節pH至待測(ce)液呈微(wei)黄色状態,随后加入钼锑抗試剂5毫升進行顯(xian)色反應,通過加蒸馏水定容至刻度(du)並充分摇匀(yun),確保溶液混合均(jun)匀。在(zai)室温高(gao)於15℃的(de)条件下放(fang)置30分鐘,使顯色反應充分進行。采用(yong)紅色滤光片或波(bo)长660nm的光進行(xing)比色測(ce)定,以空白溶液的透光(guang)率作為參照基準設定(ding)為100(即光密(mi)度為0),讀出測(ce)定液(ye)的光密度值。根據所(suo)得光(guang)密度数據,在预先绘製的標準曲線上查出顯色液對應(ying)的磷浓度(mgkg-1),完(wan)成測(ce)定。
3、標準曲線製備:吸取含磷(lin)(P)5mgkg-1的標(biao)準溶液0、1、2、3、4、5、6毫升,分(fen)別加入50毫升容量瓶(ping)中,加入10毫升0.8M H3BO3,再加入二硝基(ji)酚指示剂2滴,用稀HCl和Na0H液調(diao)節pH至待測液呈微黄,再加入钼锑抗顯(xian)色(se)剂5毫升,摇匀,定容即(ji)得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mgkg-1磷標準系列溶液,與待測溶液同時比色,讀取吸收值,在方格座標紙上以吸收值為(wei)縱座標(biao),磷mgkg-1数(shu)為橫座(zuo)標,绘(hui)製成標準曲線。